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睾丸生殖细胞染色体畸变试验
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  • 2023-07-17

一、睾丸生殖细胞染色体畸变试验

染色体型畸变:染色体结构损伤,表现为两个染色单体的相同位点均出现断裂或断裂重接。

染色单体型畸变:染色体结构损伤,表现为染色单体断裂或染色单体断裂重接。

染色体数目畸变:染色体数目发生改变,不同于正常二倍体核型,包括整倍体和非整倍体。



二、试验原理

通过适当的途径使动物接触受试物,一定时间后处死动物,动物处死前用细胞分裂中期阻断剂处理,处死后制备睾丸初级精母细胞染色体标本,在显微镜下观察染色体畸变。

本方法特别适用于需考虑体内代谢活化后的染色体畸变分析。


三、试剂

0.04%秋水仙素、1%柠檬酸三钠、0.075mol/L 氯化钾溶液、甲醇/冰醋酸固定液、60%冰乙酸、pH6.8 磷酸盐缓冲液、姬姆萨染液、生理盐水、甲醇。



四、测试方法

取材、低渗、固定、离心、滴片、染色、封片、阅片。在低倍镜下按顺序寻找背景清晰、分散良好、染色体收缩适中的中期分裂相,然后在油镜下进行分析。每只动物至少分析 100 个中期分裂相的初级精母细胞。

所得各组染色体畸变率用 χ 2 检验,当各剂量组与阴性(溶剂)对照组相比,畸变细胞率有显著性意义的增加,并有剂量-反应关系时;或仅一个剂量组有显著性意义的增加,经重复试验证实后,可判为试验结果阳性。



五、周期

检测项目

测试周期(工作日)

睾丸生殖细胞染色体畸变试验

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