一、体外哺乳动物细胞染色体畸变试验
结构畸变:在细胞分裂的中期相阶段,用显微镜检出的染色体结构改变,表现为缺失、断片、互换等,可分为染色体型畸变和染色单体型畸变。
有丝分裂指数:中期相细胞数与所观察的细胞总数之比值,是反映细胞增殖程度的指标。
二、试验原理
在加入和不加入代谢活化系统的条件下,使培养的哺乳动物细胞暴露于受试物中。用中 期分裂相阻断剂(如秋水仙素或秋水仙胺)处理,使细胞停止在中期分裂相,随后收获细胞,
制片,染色,分析染色体畸变。
三、受试物要求
固体受试物需溶解或悬浮于溶剂中。
液体受试物可直接加入试验系统和/或用前稀释至适合浓度。
四、测试方法
1.使用已建立的细胞株,如中国地鼠卵巢(CHO)细胞株或中国地鼠肺(CHL)细胞株。
2.设阳性对照物、阴性对照物和至少 3 个可供分析的受试物浓度组。
3.试验前一天:细胞放CO2培养箱内培养。
4.试验时:加入受试物、S9 mix、培养液处理。
5.结束后:加入含10%胎牛血清的培养液处理,于24h内收获细胞。
6.空气干燥或火焰干燥法制片常规制片处理,用姬姆萨染液染色。
7.对染色体畸变细胞率用X 2检验,以评价受试物的致突变性。
①阳性结果表明受试物引起培养的哺乳动物体细胞染色体结构畸变。
②阴性结果表明在本试验条件下,受试物不引起培养的哺乳动物体细胞染色体结构畸变。
五、周期
检测项目 | 测试周期(工作日) |
体外哺乳动物细胞染色体畸变试验 | 73 |
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