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支原体微生物的污染检测,支原体污染的预防及处理
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  • 2021-04-06
组织细胞培养工作中,可以从以下几方面来预防支原体的污染:
控制环境污染;严格实验操作;细胞培养基和器材要保证无菌;在细胞培养基中加入适量的抗生素。
当细胞被支原体污染后若由于材料的特殊性必须保留可以采用一定的抗生素进行处理,对支原体最有抑制活性抗生素是四环素类、大环内酯类等。目前,市场上已有了新一代支原体抗生素M-Plasmocin,能有效的杀灭支原体,又不影响细胞本身的代谢,而且处理过的细胞不会重新感染支原体。另外,配合支原体检测试剂盒可以帮助尽快发现支原体的污染。

后果

细胞株若受到细菌、真菌、支原体、或是特定病毒等之污染时,会严重的影响实验的结果。而细菌、真菌等之微生物污染时,较易自培养基等的外观变化察觉。但是若受到支原体之污染时,细胞之外观较无明显变化,但是其污染会造成细胞之生长速率缓慢、细胞产生病变之型态改变等等变化。

高污染率原因

1、支原体size 0.1~0.8 um,无细胞壁,可透过一般过滤膜(0.22-0.45 um)
2、支原体污染时,没有明显的肉眼或一般光学显微镜可观察到的特征变化
3、过去缺乏简单、快速且可靠的检测方式
4、细胞流通间缺乏品管,造成实验室间的相互污染
5、研究或操作人员忽略污染问题
去除支原体污染
1、抗生素处理:BM-cyclin(Roche),MRA(mycoplasma removal agent,ICN),Ciprofloxcin(Bayer),Enrofloxacin(Bayer)
2、Nucleic acid metabolites:5-bromouracil,Hoechst 33258,bromodeoxyuridine
3、Anti-sera
4、Nocard™ Rid处理
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